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INSTITUT DE PHYSIQUE ET DE CHIMIE DES MATERIAUX DE STRASBOURG
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Optique ultra-rapide et Nanophotonique (DON) Instruments du DON Microscopie optique nonlinéaire

Microscopie optique nonlinéaire

Un système de microscopie biphotonique versatile doté d’un système assurant un balayage rapide du faisceau laser à l’aide d’un système de miroirs oscillants à haute fréquence à été construit. La source est un laser laser femto-seconde ( Tsunami, Spectra-Physics) accordable en longueur d’onde sur une plage de 700 à 1000nm. Deux techniques d’imagerie sont opérationnelles :

- la microscopie biphotonique de fluorescence
- la microscopie biphotonique de génération de second harmonique

spip.php

Montage du microscope.

info

Microscopie biphotonique de fluorescence

La première consiste à détecter à l’aide d’un photomultiplicateur la fluorescence induite par absorption à deux photons. Le but est de pouvoir suivre l’évolution in situ d’espèces biologiques préalablement marqués par des fluorophores endogènes ou exogènes. Le système permet de sonder les tissus en volume avec une résolution submicronique.

Cellule de racine de tabac : taille d’image 100x100 µm, résolution 0.5 µm.

Cellule de racine de tabac : taille d’image 100×100 µm, résolution 0.5 µm.

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En rouge : cheminement du faisceau laser à 800 nm, en vert : détection du signal de fluorescence.

En rouge : cheminement du faisceau laser à 800 nm, en vert : détection du signal de fluorescence.

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Microscopie biphotonique de génération de second harmonique

La seconde technique consiste à détecter les signaux de second harmonique induits par excitation laser, processus également quadratique en fonction de l’intensité de la pompe et possédant ainsi la même résolution spatiale que la fluorescence à deux photons. Elle possède cependant un intérêt propre complémentaire de la technique précédente du fait de sa caractéristique intrinsèque liée à la non-centrosymetrie des systèmes imagés.

  • spip4.php
  • spip5.php
  • spip6.php
  • spip7.php

Il est à noter que le système construit pour l’imagerie biphotonique est également utilisé pour réaliser des micro- et nano-structures dans des matériaux photopolymérisables par absorption à deux photons.

Institut de Physique et de Chimie des Matériaux de Strasbourg

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